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痘苗病毒DNA提取实验

实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒 Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液 蛋白酶 K用 50 mmol/L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1:1苯酚氯仿1 mol/L 乙酸钠乙醇仪器、耗材 分光光度计Sorvall 离心机实验步骤 1. 在 260 nm 处确定纯化的疸苗病毒的光密度,将 20 个光密度单位的病毒(见「痘苗病毒纯化实验」 步骤 24)加入到 50 mmol/L pH 7.8 的 Tris • Cl 缓冲液中,终体积为 1.2 ml。2. 将以下溶液加到病毒悬液中(终体积为 2 ml):0. 1 ml 1 mol/L pH 7.8 的 Tris • Cl0.1 ml 10% SDS0.2 ml 60% 蔗糖溶液0.4 ml 10 mg/ml 蛋白酶 K37℃ 温育 4 h。3. 用苯酚抽提 2 次,每次加入等体积的平衡苯酚,摇动离心管轻轻混匀,室温,300 g 离心 10 min,用去掉头部的枪头......阅读全文

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织DNA提取的基本方法

石蜡包埋组织的DNA提取蜡包埋组织DNA提取的基本方法影响DNA提取质量的因素提高DNA提取质量的方法  近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和

临床样本核酸提取全攻略

¤ 临床检验样本RNA的提取人和动物全血、血清、血浆、脑脊液、人淋巴细胞中提取总RNA或病毒RNA——血液(液体样本)总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)货号:RP4001  700元/50次血清、血浆、全血(或其他含病毒的液体)中同时提取病毒基因组和RNA——病毒基因组DNA/RNA快速提

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

石蜡包埋组织的DNA提取

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

石蜡包埋组织的DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

DNA提取方法 影响提取质量的因素 提高提取质量的方法

一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚

石蜡包埋组织DNA提取方法

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表过和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

  一、引言   在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。   重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:   a、鉴定分析

DNA快速检验全球研究进展(二)

2.2 快速扩增检验一种常用的快速扩增研究方法是选用合适的快速酶并结合快速循环程序对现有的常规试剂盒进一步优化,以达到缩短PCR扩增时间为目的。如2008年Vallone等[13]将PyroStart和SpeedSTAR两种酶结合使用,PyroStart酶(Fermentas,Glen Burn

研究蛋白质与DNA相互作用的主要方法

一、引言在许多的细胞生命活动中,例如DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到DNA与蛋白质之间的相互作用的问题。重组DNA技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要:a、鉴定分析参与基因表达调控的DNA元件

DNA快速检验全球研究进展(一)

影视作品《神探狄仁杰》中狄仁杰征求助手李元芳的意见从而借对话引出对案情分析的桥段,其中会包含对遇害者的情况分析诊断,也就是“古代法医”的部分工作。1247年(中国南宋理宗淳祜七年),时任湖南提点刑狱兼大使行府参议官的宋慈编写完成《洗冤集录》,这是世界历史上第一本以死亡方式系统编辑的法医学著作。《洗冤

离心机的温度在司法中的重要作用

在司法鉴定、分子生物学、生物制药等领域,离心机几乎是实验室中出镜率最高的仪器了,而离心温度控制一直是最关键却容易被忽视的一点。今天就让小编带你走近离心机的世界一探究竟吧!相信看过美剧《CSI》(犯罪现场调查)的朋友们一定对剧中诸如指纹数据库、从带血棉签中五分钟内验出DNA等等炫酷的证据检测桥段并不陌

DNA提取中的常见问题分析

提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰, DNA质量一直不高,如何消除多糖的影响? 参考见解:一般来说,SDS法提取的DNA会还有较多的多糖,使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高,可用以下方法试一试: 1、 在 DNA 未溶出之前,先用一

离心内部环境的"温度控制"对于司法鉴定的重要性

离心机的世界也可以很有趣——你所不知道的“温度控制”相信看过美剧《CSI》(犯罪现场调查)的朋友们一定对剧中诸如指纹数据库、从带血棉签中五分钟内验出DNA等等炫酷的证据检测桥段并不陌生,虽然是源于想象的虚构,但却自然而逼真。其实,纵观司法科学鉴定技术的发展长河,《CSI》里面的许多高科技手法在现实中

大肠杆菌质粒DNA的提取及转化

实验概要本实验包括大肠杆菌质粒DNA的提取,质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定,大肠秆菌感受态细胞的制备及质粒DNA高频转化大肠杆菌。实验步骤1. 大肠杆菌质粒DNA的提取碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下:  

离心机的世界也可以很有趣——你所不知道的“温度控制”

相信看过美剧《CSI》(犯罪现场调查)的朋友们一定对剧中诸如指纹数据库、从带血棉签中五分钟内验出DNA等等炫酷的证据检测桥段并不陌生,虽然是源于想象的虚构,但却自然而逼真。其实,纵观司法科学鉴定技术的发展长河,《CSI》里面的许多高科技手法在现实中已被广泛应用,特别是DNA技术的应用无疑是个历史性的

生化分析仪器助力DNA检测

生化分析仪器助力DNA检测    原始亲子鉴定方法缺少科学依据    外貌对比    由于遗传的原因,父子、母子、兄弟姐妹之间的长相、肤色等一般都会有某些相似的地方,通过外貌长相的对比来确定亲子关系恐怕是zui原始的方法,但这样方法只是一种猜测、判断,作为一种参考。    滴骨验亲    滴骨验亲法

如何选择最佳的全血DNA、RNA提取方法?

从全血中提取DNA和RNA应该说是最基本的工作了,提取的DNA和RNA质量的好坏直接影响了下游的实验和分析,可供选择的方法非常多,乱花渐欲迷人眼,如何选择最适合的方法,成了很多人实验开始前最难以抉择的事情。我们从两个方面,层层剥茧,分析最佳的实验方法。 1、全血的采集保存和DNA的提取I. 用含抗凝

DNA提取中的常见问题分析

提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰, DNA质量一直不高,如何消除多糖的影响?参考见解:一般来说,SDS法提取的DNA会还有较多的多糖,使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高,可用以下方法试一试:1、 在 DNA 未溶出之前,先用一些缓冲液洗去多糖。如可用

生化分析仪器助力DNA检测

 生化分析仪器助力DNA检测    原始亲子鉴定方法缺少科学依据    外貌对比    由于遗传的原因,父子、母子、兄弟姐妹之间的长相、肤色等一般都会有某些相似的地方,通过外貌长相的对比来确定亲子关系恐怕是zui原始的方法,但这样方法只是一种猜测、判断,作为一种参考。    滴骨验亲   

生化分析仪器助力DNA检测

  原始亲子鉴定方法缺少科学依据    外貌对比    由于遗传的原因,父子、母子、兄弟姐妹之间的长相、肤色等一般都会有某些相似的地方,通过外貌长相的对比来确定亲子关系恐怕是zui原始的方法,但这样方法只是一种猜测、判断,作为一种参考。    滴骨验亲    滴骨验亲法就是将生者的血液滴在死人的骨骸

实验室离心机可以用来做亲子鉴定吗

在医疗行业,离心机的使用率越来越广,可以涉及到很多层面,但是大家知道离心机可以用来做亲子鉴定吗?用离心机做亲子鉴定准确度怎样?下面由国内一线离心机品牌代理商-上海赵迪生物科技的技术人员为你介绍如何用医用离心机做亲子鉴定:首先要抽取1-3毫升静脉血:先采集血样,就开始提取里边的DNA了。血样采集和抽血

微阵列中期分裂相染色体的比较基因组杂交(CGH) 实验

实验方法原理 实验材料 高分子质量基因组DNA EcoR I 或 Dpn II试剂、试剂盒 SSCcDNA阵列dNTP 混合液 dCTP 酵母 tRNADNA 聚合酶 I仪器、耗材 Qiaquick PCR 纯化试剂盒 BioPrime 标记试剂盒Micrcon 30 滤器杂交炉Maxiprep D

几种DNA提取方法的优缺点比较

  几种DNA提取方法的优缺点比较   文章来源:洛阳吉恩特生物科技有限公司   自然界中无论是植物、动物还是病毒,DNA作为大部分生物的遗传物质,在遗传中起着不可替代的作用,为了研究生物的基因,就需要将DNA从细胞中提取出来,这个过程有很多方法可以实现,目前比较常用的有苯酚氯仿抽提法、离心柱法

DNA快速检验全球研究进展(三)

芯片毛细管电泳具有进样量少,灵敏度高,分析速度快等特点,非常适合法医DNA-STR的快速检验。毛细管电泳芯片由于尺寸小,可施加较大场强,所以在几秒钟内就可完成对样品的分离,微阵列毛细管电泳芯片可实现高通量检测则成为目前学者研究的热点。2002年Emrich CA等[31]报道的将高通量384孔毛

石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项

从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA

质粒DNA的分离、纯化和鉴定 (三)

操作步骤    一、 细菌的培养和收集    将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。&n

石蜡包埋组织样本提取出高质量DNA/RNA的难点和注意事项

从石蜡包埋组织本中提取可用于下游应用的高质量的生物分子是比较困难的,存在的主要难题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。那么如何从石蜡包埋的组织样本中提取出高质量的DNA/RNA就成了关键问题,这里推荐专用的BIOG石蜡包埋组织DNA抽提试剂盒。BIOG石蜡包埋组织DNA提取试剂盒(BIOG DNA