双标签的分离实验

试剂、试剂盒溶液与缓冲液BSALoTEcDNA标签实验步骤一、用 NlaIII 消化双标签,释放接头1.向 480ul 已纯化的 PCR 产物中加入下列成分:2.在 37℃ 下消化 Ih(不要热失活酶,否则将致使 22~26bp 的小双标签变性)。3.消化产物可以在 4℃ 下过夜保存,或者用 Dynabead 进行生物素化 PCR 产物的提取。二、用 Dynabead 提取生物素化产物注意:本步骤中,由于生物素链霉抗生物素的捕获,去除了接头及未酶解或者部分酶解的产物,从而富集反应产物。1.荡链霉抗生物素 M-280 Dynabead 1 min,使其重新成为悬液。2.将 3 份 IOOul 的 Dynabead 转移入 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。3.用磁设备固定磁珠,弃去上清液。4.200ulIX 结合及冲洗缓冲液重悬冲洗 3 次,固定磁珠,弃去冲洗液。5.NlaIII 酶解过的双标签(体积为 600ul) ......阅读全文

分离核仁实验

分离核仁从人肝脏或胎盘组织中分离核仁HeLa细胞细胞核或核仁的制备高镁法分离核仁实验材料肝脏                                                          试剂、试剂盒NKM                                    

分离核仁实验

实验材料 肝脏试剂、试剂盒 NKM仪器、耗材 粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤 1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L

线粒体分离实验

从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体             实验材料 细胞

线粒体分离实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210

银耳菌种的分离实验

一、实验目的 1.了解混合类型菌丝的概念; 2.掌握银耳菌种分离的方法; 3.学会银耳耳木分离的具体方法步骤。 二、实验材料 长有银耳的段木若干根、锯条、解剖刀、接种镊子、斜面培养基、75%的酒精棉球、培养皿、0.1%升汞水、手表、纱布、酒精灯、接种箱等。 三、实验步骤 1.选一根生

银耳菌种的分离实验

一、实验目的1.了解混合类型菌丝的概念;2.掌握银耳菌种分离的方法;3.学会银耳耳木分离的具体方法步骤。二、实验材料长有银耳的段木若干根、锯条、解剖刀、接种镊子、斜面培养基、75%的酒精棉球、培养皿、0.1%升汞水、手表、纱布、酒精灯、接种箱等。三、实验步骤1.选一根生长银耳的朵大肉厚且密的耳木一根

树突细胞的分离实验

实验步骤基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年,其间只经过了微小的修改(Steinman衫aZ., 1979)材 料(带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液(见辅助方案)高密度牛血清白蛋白(BSA) 溶液R P M

FDA发布关于食品份量大小和双栏标签的最终行业指南

  2019年12月30日,美国食品药品监督管理局(FDA)发布了关于食品份量大小和双栏标签的最终行业指南。  这份行业指南旨在帮助包装食品生产企业遵守美国食品药品监督管理局更新的营养成分标签条例。部分原文报道如下:  The U.S. Food and Drug Administration to

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

常见蛋白标签6xHis标签

6xHis标签,也称为多组氨酸标签(polyhistidine ),His6标签或hexa组氨酸标签,这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相对小的分子量,低的免疫原性,亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性,因此在天然

组织的分离实验_离心分离法

实验方法原理如培养物为血液、羊水、腹水和胸水等细胞悬液时,可采用离心法分离。一般用低速500~1000 转/分速度,离心5~10 分钟即可。如悬液量大,离心时间可适当延长,但如离心速度过大和时间太长,易压挤细胞使之受损或死亡。微量全血法淋巴细胞培养时,可不必进行淋巴细胞分离,可采用全血培养法。在需用

组织的分离实验_EDTA-消化分离法

实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作

解析多肽分离实验

CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器(Beckman) 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作指南进行同样的分离。实验材料多肽混合物试剂、试剂盒0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(p

解析多肽分离实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 多肽混合物

鸡胚分离实验

实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮

解析多肽分离实验

实验方法原理 实验材料 多肽混合物试剂、试剂盒 0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器实验步骤 1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管:10 倍柱体积的 0.1 m

分离小鼠胚胎实验

分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神

分离小鼠胚胎实验

            实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经

鸡胚分离实验

            实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。 实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25

鸡胚分离实验

实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培

分离小鼠胚胎实验

实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠(已知怀孕时间)子宫,分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配,雌鼠 3 天后可进入动情期,此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行,使胚胎在适宜的时间

ECHA就双酚A统一分类标签的修订开展公众咨询

  2013年8月27日,欧洲化学品管理局(ECHA)就双酚A(CAS No.: 80-05-7; EC No.: 201-245-8)的统一分类标签(CLH)进行为期45天的公众咨询,各方可在2013年10月11日前对其发表评论。   此前,法国提议将双酚A的统一分类标签由当前的生殖毒性2类

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

分离核仁实验——高镁法分离核仁

实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液:0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4,pH 7.0蔗糖 A

果蝇的双因子实验

实验方法原理 自由组合定律的实质是基因的分离是独立的,而在配子中非等位基因自由组合,产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型,比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状:长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂交实验,旨在验证

蛋白质组的同位素标记亲和标签(ICAT)技术分离介绍

  同位素亲和标签技术是一种用于蛋白质分离分析技术,此技术是蛋白质组研究技术中的核心技术之一。该技术用具有不同质量的同位素亲和标签( ICATs) 标记处于不同状态下的细胞中的半胱氨酸,利用串联质谱技术,对混合的样品进行质谱分析。来自两个样品中的同一类蛋白质会形成易于辨识比较的两个不同的峰形,能非常

树突细胞的分离实验(一)

基 本 方 案 1 塑 料 黏 附 和E A 玫 瑰 花结 富 集DC此种技术用于分离DC已经使用了很多年,其间只经过了微小的修改(Steinman衫aZ., 1979)材 料(带V 项 目 见 附 录 1)胶原酶消化的脾脏细胞悬液(见辅助方案)高密度牛血清白蛋白(BSA) 溶液R P M I 16

蛋白质的分离实验

实验方法原理 凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽

蛋白质的分离实验

凝胶层析法 IEF(等电点聚焦电泳)法             实验方法原理 凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯

中间丝的分离方法实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液:在 PBS 中加入:1