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PCRArray简单实用的检测基因表达的高通量方法(四)

RT2ProfilerTM PCR芯片特点灵敏度 研究者总是希望能检测到表达量相当低的基因,有时候,研究者得到的起始总RNA量也很少,但仍希望能进行实时定量PCR检测。为了满足研究者的这些需要,Superarray严格检测了PCR芯片系统的灵敏度。例如,Superarray使用PCR芯片检测了一系列总RNA样本,这些样本的浓度都不相同,使用的PCR芯片为炎症细胞因子和受体基因芯片,通常,这些基因的表达量都是很低的。图3将阳性信号的比例(Ct<35的基因所占百分比)与相应的总RNA量对应起来作图。结果表明,当起始的总RNA范围在5.0ng到1.0ug(甚至是5.0ug)时,每张PCR芯片的阳性信号比率均超过85%。对于表达量更高的基因,芯片检测的灵敏度还会大大提高,即在起始RNA量更低的情况下,芯片能够检测到的阳性信号比例更高。值得注意的是,起始的总RNA量最好不要低于0.5-1.0ug,否则会造成阳性信号损失。由于阳性信号......阅读全文

DNA甲基化检测技术全攻略

近年来涌现出不少DNA甲基化的检测技术,少说也有十几种。大致可以分为两类:特异位点的甲基化检测和全基因组的甲基化分析,后者也称为甲基化图谱分析(methylation profiling)。下面大家介绍一些常用的方法。一、特异位点的甲基化检测1. 甲基化特异性PCR(MS-PCR)这种方法经济实用,

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