蛋白质N端选择性仿生转氨化合成抗HIV药物取得进展
蛋白质的定点修饰是通过化学反应对蛋白质特定位点进行修饰,从而达到对蛋白质改性或对其进行标记等一系列目的。蛋白质的定点修饰对反应条件严格:反应需在水相溶液中进行,同时蛋白质其它侧链基团不参与反应。近日,上海交通大学特别研究员王平课题组与中国科学院昆明动物研究所研究员郑永唐课题组合作,发展了一种由仿生的邻醌介导对蛋白N-端进行选择性修饰的方法,并将其运用于蛋白质标记和抗HIV药物研发等领域。 蛋白质的N-端-α胺基相较于赖氨酸的ε胺基有较低的pKa,因而更具有亲核性,是蛋白质定点修饰的理想位点。自然界中,铜胺氧化酶催化酪氨酸的侧链酚基被氧化成邻醌,邻醌可将体系内的一级胺氧化成醛、酮基。受此启发,科研人员发展了蛋白质仿生转氨化的方法。通过筛选多种邻醌类化合物与模板肽进行反应,发现邻醌试剂在pH 6.5的缓冲水溶液中具有最高活性,能在2小时内将N-端为甘氨酸的模板肽8转换为醛,随后与乙氧基胺作用产生更稳定的肟产物9,两步总转换率达......阅读全文
蛋白质N端选择性仿生转氨化合成抗HIV药物取得进展
蛋白质的定点修饰是通过化学反应对蛋白质特定位点进行修饰,从而达到对蛋白质改性或对其进行标记等一系列目的。蛋白质的定点修饰对反应条件严格:反应需在水相溶液中进行,同时蛋白质其它侧链基团不参与反应。近日,上海交通大学特别研究员王平课题组与中国科学院昆明动物研究所研究员郑永唐课题组合作,发展了一种由仿
化学所在不对称催化的仿生转氨化方面取得新进展
具有光活性的α-氨基酸是生物体和有机合成中最为重要的物质之一,它们既是维持生物体生命延续的关键要素,也是有机合成中的一类重要结构骨架。人体内α-氨基酸的合成是通过α-酮酸的转氨化反应实现的,这个转氨化过程需要辅酶维生素B6和特定的生物转氨酶共同完成。在有机不对称催化中,能够发展一
英美研制首个杀灭HIV“仿生杀手”
艾滋病病毒(HIV)传染已经成为人类健康面临的最严重挑战。很少有艾滋病病人能够被治愈,如今已有3300万人感染了HIV,并且这个数字还在以每年100万递增。 现在,科学家朝着艾滋病的治疗迈出了重要一步。一家英国公司日前研制出可以识别HIV众多伪装,并能够充当“仿生学杀手”的免疫细胞,该公司
氨化[作用]的概念
中文名称氨化[作用]英文名称ammonification定 义有机物降解生成氨的反应。如细菌作用于蛋白质而产生氨。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)
氨化[作用]的定义
中文名称氨化[作用]英文名称ammonification定 义有机物降解生成氨的反应。如细菌作用于蛋白质而产生氨。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)
蛋白质的电转
实验概要很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80μg/cm2。与其它膜相比,NC膜具有不要预先活化,对转移物质生物活性影响不大,能应用多种染
蛋白质转印法
蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经尿素洗去SDS,并使蛋白质回復原态抗原性,可使用抗体进行免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Transphor TE 52):转印
蛋白质转印法检定蛋白质
蛋白质转印法检定蛋白质 蛋白质经SDS-PAGE后,胶片浸入转印缓冲液,蛋白质可被转印到硝化纤维纸(nitrocellulose) 上,先经?素洗去SDS,并使蛋白质回?原态抗原性,可使用抗体进?免疫染色 (Towbin et al, 1979)。仪器用具:电泳转印槽 (Hoefer Tra
蛋白质的电转实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 转移缓冲液甲醇电极缓冲液仪器、耗材 电转移槽电泳仪实验步骤 1. 剪6块3 MM 滤纸和一块NC膜。2. 将剪好的3 MM 滤纸和NC膜在转移缓冲液中浸泡3-5分钟。3. 按下列过程安装转移装置,将塑料支架平放在含转移缓冲液的托盘中,在塑料支架上放一块海绵。4.
蛋白质的电转实验
实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液甲醇电极缓冲液仪器、耗材电转移槽电泳仪实验步骤1. 剪6块3 MM 滤纸和一块NC膜。2. 将剪好的3 MM 滤纸和NC膜在转移缓冲液中浸泡3-5分钟。3. 按下列过程安装转移装置,将塑料支架平放在含转移缓冲液的托盘中,在塑料支架上放一块海绵。4. 将3块
蛋白质的电转实验
很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80 μg/cm2。实验方法基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒 转移缓冲液 甲醇 电极缓冲液
蛋白质的电转实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
一氯乙酸氨化法合成甘氨酸
将氨水与碳酸氢铵混合加热至55℃,加入一氯乙酸水解溶液反应2h。然后升温至80℃脱除剩余的氨,用活性炭脱色。过滤后,滤液加95%的乙醇使甘氨酸结晶析出。分离后用乙醇洗涤。烘干后得粗品。粗品用热水溶解,再加乙醇重结晶,即得成品,收率约42%
新技术助蛋白质转印法提速
在发明蛋白质印迹法(Western Blot)出现了30多年之后,这项技术仍然是获取特定蛋白可靠鉴定的关键。许多近期涌现的产品利用各种方法来提高蛋白质印迹实验的可重复性、敏感性、定量性以及速度。 有三个人都被认为发展了蛋白质的免疫印迹方法,但其中只有一人才算得上是“Western B
转印到膜上的蛋白质检测实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 PBSTween印度墨汁仪器、耗材 摇床实验步骤 1. 将转印膜置于塑料容器中,在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次,每次30 min,然后再于室温用Tween 20溶液洗2次,每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Twe
企业为何“不想转”“不敢转”“不会转”?
企业“不想转”“不敢转”“不会转”,资源要素支撑相对不足,高端化、智能化、绿色化、融合化水平参差不齐,转型升级环境尚待优化……7月4日,在“粤商·省长面对面协商座谈会”上,关于传统产业转型升级的讨论热火朝天。 习近平总书记在二十届中央财经委员会第一次会议上强调,“坚持推动传统产业转型升级,不能
一文读懂蛋白质转印原理-大分子量蛋白转印有哪些技巧
通过凝胶电泳分离蛋白后,蛋白质被转移到固体膜载体上进行后续步骤。有效的转印依赖于膜的选择、所使用的转印设备的类型以及转印缓冲液的组成。 转印条件 蛋白的有效转印依赖于蛋白质从凝胶中迁移出来,也依赖于蛋白在膜上的滞留。像凝胶电泳一样,转印步骤将带负电荷的蛋白转印到带正电荷的电极上。转印效率受所
转印到膜上的蛋白质检测实验_金染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒金染料溶液仪器、耗材摇床实验步骤1. 如”印度墨汁染色“之第1步操作洗涤转印膜。 2. 在AuroDye胶体金染料溶液中染色3 h,或连续摇动过夜。3. 用水冲冼膜,晾干。
仿生材料
由于超疏水材料,特别是表面改性后仿生材料(仿荷叶超疏水或仿壁虎钢毛结构超亲水材料)的接触角的表征因结构的特殊性,测试起来特别困难。现有的理论通常基于Wenzel和Cassie模型。这些理论为我们的分析奠定了一定的基础,而实际应用于本征接触角的表征计算时难度相当大。有一些科研人员力图通过分析表面粗糙度
转印到膜上的蛋白质检测实验_印度墨汁染色
实验材料蛋白质试剂、试剂盒PBSTween印度墨汁仪器、耗材摇床实验步骤1. 将转印膜置于塑料容器中,在旋转摇床中于37℃用Tween 20溶液洗涤3次,每次30 min,然后再于室温用Tween 20溶液洗2次,每次30 min。2. 用印度墨汁溶液染膜3 h或过夜。 3. 在Tween 2
免疫印迹与免疫检测实验——转移槽转印蛋白质
实验材料蛋白质试剂、试剂盒转移缓冲液仪器、耗材摇床海绵纤维素膜尼龙膜电转仪实验步骤1. 制备抗原样品,并用小型或标准尺寸的单向或双向凝胶分离蛋白,在一个或多个泳道中分离预染色或生物素酰化的蛋白质分子量标准。2. 电泳完成后,拆卸凝胶夹层,去除积层胶。以适量的转移缓冲液室温平衡凝胶30 min。3
湿转和干转,哪个方法更好
对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。 对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发
转管培养法与转瓶培养
转管培养法(roller tube culture)是Gey 提出的,实验室常用,为了扩大细胞产量,将试管改用转瓶,故称转瓶培养,其培养方法是一样的,试管或转瓶固定在支加上,倾斜度为5°~10°左右,或将转瓶放在一排排转轴之间,使转瓶随着转轴以每小时6~12 转缓慢转动。细胞贴附于玻璃壁
湿转和干转,哪个方法更好?
对于一个完美的westernblot实验,蛋白在聚丙烯凝胶中根据天然分子量进行分离,蛋白被很好的从凝胶上转移到固相支持物上,然后通过特异性的抗体进行免疫检测。对于转印来说,使用湿转的方法是比较好的,因为凝胶和膜都能够完全浸没在转印buffer中,在半干转的条件下,转印是在两个电极板之间发生,这种类型
做western转膜,用湿转电泳,还是半干转电泳好
半干转要用专门的半干转膜仪,而湿转用电泳仪配附件即可;半干转所需时间较短,但控制不好,中间发热比较大容易把膜和胶烘坏;而湿转耗时较长,尤其对大分子量的蛋白转膜效果较好。相对来讲,还是湿法转膜的实验室多一些。
Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好?
关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是
Western-转膜时用干转还是湿转效果比较好
关键看效果怎么细分,干转,速度快,效率稍低,湿转,速度比较慢,转移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量为主,干转就挺好的,效率非常高,几分钟就做完了。分子量特别大,又没有其他人的方案做参考,可以先试试湿转。就是几个小时等得比较痛苦。好几个人做的话,真是等到花儿也谢了。至于说效果,不是
兰州化物所研发加固仿生自清洁硅基仿生材料
出淤泥而不染的荷叶,捕虫高手猪笼草,科学家们研究仿生,利用自然界赋予的神奇功效为人类服务。然而,仿生“荷叶”和“猪笼草”却有一颗“玻璃心”,一旦受到外界触碰,“自清洁”功能也随即消失。 “我们要做可以应用的硅基仿生自清洁材料。”中科院兰州化学物理研究所甘肃省黏土矿物应用研究重点实验室张俊平研究
与HIV病毒传播有关的蛋白质实际上对生育有好处
在精液中发现的蛋白质片段,以前只知道它们能增强艾滋病毒感染的能力,也似乎在生殖生物学中扮演着重要的角色。来自格拉德斯通研究所、加州大学旧金山分校(UCSF)和德国乌尔姆大学的一组研究人员发现,这些碎片可以帮助处理受损或不需要的精子。 最近几年,科学家们惊奇地发现,精液中含有的蛋白质聚集在一起,
一批蛋白质样品随神十七上天,将助力可降解仿生骨骼研制
10月26日,搭载神舟十七号载人飞船的长征二号F遥十七运载火箭在酒泉卫星发射中心点火发射并进入预定轨道,航天员乘组状态良好,发射取得圆满成功。刚刚干了一个通宵的中国科学院空间应用工程与技术中心研究员仓怀兴和同事,正激动地目送火箭腾空。就在8小时前,他们成功护送一批鲜活的蛋白质样品乘上了飞船,现在