NatureProtocols快速重复地对肿瘤蛋白进行深度分析和定量

蛋白质定量分析(Protein－determination)

实验概要本文介绍了蛋白质定量分析(Protein determination) Bradford 的dye-binding method的原理、样品配制及操作步骤等。实验原理Bradford  的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250

蛋白质定量分析（Protein－determination）

Bradford 的dye-binding method 是利用Coomassie brilliant blue G-250 （CBG） 可与蛋白质结合而变色的特性来定量 （Bradford, 1976）；若试样中的蛋白质量较多，则结合到蛋白质而变色的CBG 也多，因而呈色较深。下例是以一组

蛋白质定量

Quantitative Determination of Peptides by Sulfhydryl (-SH) Groups New (Contributed by David Van Horn, Dept. of Chemistry, UC Berkeley Greg Bulaj, Dept

UV法蛋白质定量分析简述

　　这种方法是在280 nm波长，直接测试蛋白。选择 Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。　　蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除 320 nm的“背景”信息，设定此功能“开”

蛋白质定量实验

考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法 碱性铜还原分析法 胺衍生法             实验方法原理 蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基，其化学结构中

蛋白质定量实验

试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G250乙醇磷酸实验步骤 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品，可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比

定量蛋白质组表达谱分析技术iTRAQ/TMT

　　iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签，通过特异性 标记多肽的

定量蛋白质组表达谱分析技术——iTRAQ/TMT

iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签，通过特异性 标

蛋白质定量实验_碱性铜还原分析法

试剂、试剂盒Folin-Ciocalteu 试剂硫酸铜试剂碱性铜试剂实验步骤碱性铜还原分析法 (Lowry 法）（Lowryetal.，1951) 和其他能够增强检测性能的方法都是基于一个包括两个步骤的过程。首先，双缩脲反应涉及蛋白质在碱性溶液环境中将铜还原（由Cu2+到 Cu+); 随后是反应增强

蛋白质定量实验_考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法

实验方法原理蛋白质分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基，其化学结构中的共轭双键，具有吸收紫外光的特性，吸收高峰在280 nm处，蛋白质溶液的吸光度(A280)与蛋白质含量成正比关系，可作为样品中蛋白质定量测定。该方法简便、灵敏、快速，且样品用量少且可回收，低浓度的盐类也不干扰测定，但测定

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同，特别是白蛋白含色氨酸为0.2%，而γ-球蛋白中含量达2%-3%，导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+，集中原法和双缩脲反应两者的作用，使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依

蛋白质定量技术――iTRAQ

摘要：同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术是近年来最新开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术，具有较好的定量效果、较高的重复性，并可对多达四种不同样本同时进行定量分析。研究人员采用iTRAQ蛋白质定量技术加速蛋白质的定量研究，当然这门新兴的工具仍然需要进一步的完善。    仅仅知道蛋白质的身

蛋白质定量实验步骤

 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品，可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比值太高, 可能会增加反应混合物的 PH 而导致反应背景较高

蛋白质定量常用方法

1.基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使用的酚试剂比色法 由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同，特别是白蛋白含色氨酸为0.2%，而γ-球蛋白中含量达2%-3%，导致较大的差异。Lowry的改良法在酚试剂中加入Cu2+，集中原法和双缩脲反应两者的作用，使呈色灵敏度提高。其中75%的呈色依赖

氨基酸与蛋白质的定量分析

都是含量的检测,不一样就是蛋白质与氨基酸的含量检测都是含氮量检测,因此蛋白质含氮量肯定比氨基酸的含氮量要低,蛋白质的中含有其他的化学基,但作为含氮量的检测,他们属于同一事.

荧光定量PCR应用——肿瘤篇

   肿瘤是是机体在各种致癌因素作用下，局部组织细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控，从而导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学界将其分为良性和恶性两大类。肿瘤作为全球疾病致死的重要元凶之一，如果发现和治疗不及时，有可能导致人体消瘦、无力、贫血、食欲不振、发热及脏器功能受损等，其后果极为严重。 

荧光定量PCR应用——肿瘤篇

肿瘤细胞对促凋亡蛋白质敏感性定量研究取得新进展

　　近期，医学物理中心戴海明研究员课题组，建立了肿瘤细胞对仅含BH3结构域蛋白质耐受的定量测量研究的新方法，相关成果以Measurements of BH3-only protein tolerance为题发表在细胞死亡的TOP期刊Cell Death and Differentiation（doi

浅谈常见比色法蛋白质定量分析方法

　　比色法蛋白质定量 　　 蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸，丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。 　　比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒 Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材 微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤 材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液）Bradford 试剂（CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)

尿液蛋白质定量检测方法

　　丽春红-S法　　尿液标本中的蛋白质与丽春红-S染料混匀后一起被三氯醋酸沉淀，将沉淀物溶解于碱性溶液中，此时溶液呈紫色，显色深度与蛋白质浓度成正比。　　试剂三氯乙酸-丽春红-S试剂原液：称取丽春红-S 1.0 g，加入到1 000 ml 300 g/L三氯乙酸中溶解。　　三氯乙酸-丽春红-S试剂应

蛋白质的定量测定实验

试剂、试剂盒Bradford 试剂牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液Tris-缓冲盐溶液仪器、耗材微量滴定板分光光度计或酶联仪实验步骤材料与设备牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 (2 mg/ml 水溶液）Bradford 试剂（CoomassiePlus,PierceChemicalCo.)分光光

尿液蛋白质定量检测操作

　　先做尿蛋白定性试验，以适当稀释标本。在试管中加入100μl标本，再加入1 ml三氯乙酸一丽春红-S应用液，混匀后以3 000 r/min离心15分钟，吸去上清液，倒置于洁净滤纸上。在沉淀中加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液l ml，用560 nm波长测定其吸光度，查标准曲线的蛋白含量。

蛋白质的定量测定实验

            试剂、试剂盒 Bradford 试剂 牛血清白蛋白 (BSA) 标准溶液 Tris-缓冲盐溶液 仪器、耗材

蛋白质的定量测定方法

一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S

比色法蛋白质定量

比色法蛋白质定量    蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。    比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。

蛋白质的定量测定方法

一、微量凯氏（kjeldahl）定氮法样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例，其反应式如下：NH2 CH2 COOH+3H2 SO4 ――2CO2 +3S

Nature－Protocols－快速重复地对肿瘤蛋白进行深度分析和定量

　　Broad研究所蛋白质组学平台的研究人员近日在《Nature Protocols》杂志上报道了一个经过优化的新流程，能够快速且重复地对肿瘤蛋白进行深度分析和定量。　　在过去十年中，基因组学研究已经系统绘制了人类癌症的遗传改变，但这些改变对蛋白质组的直接影响还知之甚少。NIH临床蛋白质组学肿瘤分析

蛋白质定量/蛋白质含量的测定(LOWRY法)

实验概要运用LOWRY法测定蛋白质的含量。实验原理Lowry法是双缩脲法和福林酚法的结合与发展，其原理是：蛋白质溶液用碱性铜溶液处理，形成铜-蛋白质的络合盐，再加入酚试剂后，除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外，还使双缩脲法中肽键、碱性铜的显色效果更强烈。因此，Lowry法的显色效果比单独使用

蛋白质研究加码！山东大学采购蛋白质印迹定量分析系统

山东大学近日招标了多功能全自动蛋白质印迹定量分析系统，这款设备在蛋白样品上样后无需任何人工操作，能够自动完成Western Blot分析，并且具有运行时间短，无需转膜等优点。　　项目概况　　山东大学多功能全自动蛋白质印迹定量分析系统 招标项目的潜在投标人应在山东大学招标采购管理系统获取招标文件，并于