H7N9风险研究：灵药还是祸根？
这次我们想让公众理解我们想做的事、为何我们需要做，以及我们如何安全地做。 批评者认为，功能获得研究不可能预测H7N9或其他病毒是否将变成流行性病毒。 流感专家希望也能给自己接种疫苗，以防止另一场大争论的爆发。在近日发表于《自然》和《科学》杂志上的一篇通讯文章中，22位研究人员主张启动H7N9禽流感病毒潜在风险实验。自3月份以来，中国已发现了多例人感染H7N9病例，一些科学家担心这将发展成为致死性人类流行疾病。 上述研究人员大多数效力于美国资助的实验室，他们也详述了相关研究的安全性和防范措施。他们将采取各种措施预防自己创造出来的危险病毒“逃出”实验室，或者落入恐怖分子之手。美国卫生与公共服务部(HHS)也在另一篇相关的通讯文章中宣布，将对那些由他们资助的实验项目设置新审查流程。 公开意图 “该公告的意图是，阻止类似2011年研究另一种禽流感病毒H5N1的科学家卷入全球性争论的事件再次发生，这些争论......阅读全文
研究人员开展卡介苗对抗新冠病毒实验
卡介苗接种后会形成一个脓疱，脓疱会发展成疤痕。图片来源：Kwangmoozaa/iStock 4个国家的研究人员将很快开始一项针对新冠病毒的非传统方法临床试验。他们将测试一种具有百年历史的抗结核病细菌疫苗——卡介苗，是否能广泛改善人体免疫系统，从而使其能更好抵抗，或完全预防新冠病毒的感染。这项研究
病毒中和实验
实验方法原理 病毒的复制需要宿主细胞供应原料、能量和复制场所，因此病毒必须在活的细胞内复制增殖。病毒进入机体后，吸附于敏感细胞的表面，然后通过穿入，脱壳，侵入细胞，进行病毒复制和装配，并引起机体感染。特异性的抗病毒抗体（中和抗体）与病毒结合之后，使病毒失去吸附、穿入宿主细胞的能力，从而阻止了病毒在宿
病毒RNA提取实验
病毒RNA提取可以：（1）用于RNA病毒复制机制研究；（2）用于反向遗传学研究；（3）用于分子病毒学其他研究。实验方法原理大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料TMV病毒液试剂、试剂盒TE-饱和酚:氯
慢病毒实验程序
含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化，提取慢病毒载体，包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3） 培养 48hrs - 72hrs 左右，收集含有病毒的上清培养液。 4） 病毒的纯化和浓缩。 5） 分装、- 80 ℃保存。 6） 滴度测定目的基因检定，并出具检测报告。
病毒的滴定实验
1. 以维持液（0.5% 水解乳蛋白Hank's 液）将病毒作连续10 倍稀释（每一稀释度换一新吸管）。2. 如选择滴定的稀释度为l0-6～10-8，则于试管架上排列8 支试管。l0-1～10-5共5 支管，每管如入1.8 毫升维持液；l0-6～10-8共3 管，每支加入4.5
病毒RNA提取实验
TE-饱和酚/氯仿提取法 实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获
慢病毒包装实验
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后，可用于：（1）感染原代培养细胞；（2）制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株；（3）in vivo的基因操作、转基因动物，特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动
病毒RNA提取实验
实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ，并且其极性与mRNA 极性相同，植物病毒RNA 提取较为简单，一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料 TMV病毒液试剂、试剂盒 TE-饱和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE缓冲液双菌水仪器、耗材 冷冻台式离心机低温真空干燥仪电泳仪电泳槽实验步骤 一、实验
痘苗病毒纯化实验
实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞或 BHK-21 细胞代替 HeLa 细胞。实验材料 痘苗病毒储液HeLa S3 细胞（悬浮培养）试剂、试剂盒 胰酶Tris • Cl蔗糖仪器、耗材 旋转
慢病毒包装实验
实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例，每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管，加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血
痘苗病毒纯化实验
痘苗病毒通常采用蔗糖密度梯度离心的方法纯化。纯化的病毒可用于制备痘苗病毒 DNA ，用于不允许存在感染细胞蛋白污染的研究中，同时也可以用作高滴度的病毒储液。对于大规模的纯化（至少 1 L 的培养物），最好的方法是用 HeLa 细胞悬液作为感染的对象，而不要用单层培养的细胞。内容来源于《精编分子生物学
病毒的保存实验
实验方法原理 含水物质首先经过冷冻，然后在真空中使水分升华，干燥，在这种低温、干燥和缺氧环境下，微生物的生长和代谢暂时停止，因而保存期较长，便于运输。该法需要冻干机等设备，并需保护剂。保护剂一般采用脱脂牛奶或血清等。保护剂的作用机理是在冷冻干燥的脱水过程中稳定病毒结构，防止细胞膜受冷冻或干燥而造成损
病毒的分离实验
实验步骤 标本的采集：病毒分离常用的标本有血液，脑脊液，粪便，直肠拭子，咽喉含漱液，咽拭子，尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液，咽拭子；消化道疾病取粪便，直肠拭子；神经系统疾病取脑脊液，粪便等。采取标本时应避免污染，有些标本如粪便，咽喉洗液，虽本身含有大量杂菌，但为保
痘苗病毒纯化实验
大规模纯化 实验方法原理 对于很多研究，部分纯化的病毒就足够了（进行到本实验步骤 14）， 如果是纯化 MVA 病毒，则不能用胰酶消化，也不能用 CEF 细胞
慢病毒包装实验
慢病毒包装实验 实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种，具有反转录病毒的基本结构和特性：整合入宿主细胞基因组，长期表达，可用于转基因动物制备；但也有不同于反转
人类免疫缺陷病毒实验室检测技术研究进展
人类免疫缺陷病毒（HIV）检测的主要目的是用于获得性免疫缺陷综合症（AIDS）即艾滋病的病原体诊断。本文就近年来HIV检测的研究进展综述如下。 1 抗原检测 常用的HIV抗原检测是Ｐ24抗原技术。机体感染HIV后，P24抗原是最早能从血清中检出的病原学标志，通常感染
呼吸道病毒实验室检测技术研究进展
呼吸道感染是人类致病和死亡的最主要原因之一。引起呼吸道感染的病原体种类很多, 包括细菌、病毒、支原体和衣原体等, 尤以病毒多见。无论病因如何, 呼吸道感染的临床症状和体征都很相似, 而不同种类病原体引起的感染, 其治疗方法截然不同, 疗效和病程也不尽相同。因此, 快速、准确地检测和鉴别病原微
病毒中和实验_固定抗血清－稀释病毒法
实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活）宿主：敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤（以细胞培养为例）：①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度
病毒包装技术——病毒包装实验经验总结
第一，细胞状态、载体系统、目的基因对病毒包装影响(基因大小、序列情况、蛋白功能毒性等）是三个主要影响病毒质量的因素。第二，细胞状态需要有丰富的细胞培养经验来判断，比如包装或转染感染前一定要重视细胞干净细微污染与否、饱满立体感是否好、铺板均匀细胞密度适中否等性状。另外转染时细胞的密度要十分注意，一般在
病毒中和实验_固定病毒－稀释抗血清法
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖，因此，中和试验必须
武汉病毒研究所在病毒纳米生物学研究获进展
近日，中国科学院武汉病毒研究所-生物物理研究所联合团队在病毒纳米生物学研究中取得新进展。该团队在国际上首次提出了借助蛋白质的表观临界组装浓度控制病毒纳米颗粒（virus-based nanoparticles，VNP）组装，从而在其内部相容性包装外源物质的策略。相关工作3月21日在线发表于国际期
痘苗病毒DNA提取实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 纯化的痘苗病毒
痘苗病毒DNA提取实验
如果提取的痘苗病毒DNA用于转染，则应在蛋白酶 K 消化和苯酚抽提后分离。具体方法见本实验。实验材料纯化的痘苗病毒试剂、试剂盒Tris•Cl 溶液SDS蔗糖溶液蛋白酶 K用 50 mmol／L Tris • Cl 溶液平衡的苯酚1：1苯酚氯仿1 mol／L 乙酸钠乙醇仪器、耗材分光光度计Sorval
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。斜
昆虫病毒的培养实验
实验方法原理 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。
重组病毒噬斑筛选实验
实验材料 转染细胞溶解产物 BS-C-1／HuTK-143B／BHK-21／CEF 贴壁生长汇片的细胞 试剂、试剂盒
病毒的培养方法实验
实验方法原理 鸡胚培养方法操作简便，适用于流感病毒，痘病毒，疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种，即绒毛尿囊膜接种法，羊膜腔（羊水囊）接种法，尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不同目的采用适宜的接种方法。实验步骤 1. 鸡胚的检查将9～11 日龄鸡胚置于检卵器上，照视观察
EB病毒的实验诊断
EBV分离培养困难，一般用血清学方法辅助诊断。 在有条件实验室可用核酸杂交和PCR等方法检测细胞内EBV基因组及其表达产物。
病毒免疫荧光实验
实验方法原理 实验材料 待检测病毒试剂、试剂盒 丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯仪器、耗材 玻片实验步骤 1. 培养细胞小玻片标本的制备 根据所检测病毒种类，选择敏感细胞进行培养，如乙型肝炎病毒用乳地鼠肾细胞 (BHK21 细胞）培养，森林脑炎病毒用绿猴肾细胞 (Vero 细胞）培养
吸附法纯化病毒实验
实验方法原理 实验材料 待纯化的病毒试剂、试剂盒 凝胶材料仪器、耗材 烧杯实验步骤 磷酸钙凝胶：这是病毒凝胶吸附法中较为常用的凝胶，由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制备凝胶状沉淀物，用 0. 001mol/L 磷酸盐缓冲液悬浮，置千 4℃ 4~5