一文了解nc膜生产条件
酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane，简称NC膜)，是蛋白印迹广泛使用的转移介质，对蛋白有很强的结合能力，而且适用于各种显色方法，包括同位素，化学发光（Luminol类）、常规显色、染色和荧光显色；背景低，信噪比高。在胶体金试纸中用做C/T线的承载体，同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中重要的耗材之一。 硝酸纤维素NC膜的使用很简便，比如不需要甲醛预处理，只要在去离子水面浸润排出膜内气泡，再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了；硝酸纤维素 NC膜很容易封闭，也不需要特别严谨的清洗条件。转移到硝酸纤维素NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间，不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆，又容易卷，操作要小心，不适合用于需要多次重复清洗的用途，因为经不起多次“折磨”。 选择硝纤NC膜时要注意的是选择合适的孔径，通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜，小于20KD的话建议......阅读全文
蛋白质的电转实验
基本方案 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
蛋白质的电转实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 转移缓冲液甲醇电极缓冲液仪器、耗材 电转移槽电泳仪实验步骤 1. 剪6块3 MM 滤纸和一块NC膜。2. 将剪好的3 MM 滤纸和NC膜在转移缓冲液中浸泡3-5分钟。3. 按下列过程安装转移装置，将塑料支架平放在含转移缓冲液的托盘中，在塑料支架上放一块海绵。4.
Western印迹法检测蛋白
实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng，0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg，所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一，即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时，应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭，靶蛋白与第一抗体的反应，结合靶蛋白的一抗
Western印迹法检测蛋白
实验概要Western印迹法检测蛋白的敏感性约为1-5ng，0.75mm厚的SDS-PAGE板的一个孔可上总蛋白量约为100μg，所以只要被检蛋白不低于总蛋白量的万分之一，即可被检测出来。如果所分析的样品为未知时，应同时作阳性对照。杂交技术主要有NC膜的封闭，靶蛋白与第一抗体的反应，结合靶蛋白的一抗
中节能六合天融信息化管理平台（NC系统）正式启动
按照中节能集团公司信息化管理的要求，中节能六合天融公司于2010年9月正式启动NC核算系统。目前正在处于紧张的初始建账阶段，预计本月完成并投入使用，此项举措不仅大大提高了集团对下属子公司的管控力度，随时了解下属子公司的经营状况和成果，同时，借助NC系统，也将大大提高我公司规范管理程度，便
浅谈NC71/LXTHY18F润滑油检测仪器
润滑油检测仪器的优点：增加了交、直两用功能（直接可连续工作28小时），外型精美，操作简便，适用于现场及野外作业。在无样油的情况下，也可以正常测量油中水份含量。润滑油检测仪器产品功能：◆ 3分钟内检测出润滑油的污染程度◆ 判断新购油品是否合格◆ 检测60微米以上的金属磨粒润滑油检测仪器技术指标：测量范
固相载体上的斑点免疫金银染色法
实验概要本实验介绍了硝酸纤维素膜(NC膜)上的斑点免疫金银染色操作流程。实验原理蛋白质抗原通过直接点样或转移电泳吸附在硝酸纤维素膜(NC膜)上，与特异性抗体反应后，在滴加(或浸入)胶体金标记的第二抗体，结果在抗原抗体发生金颗粒聚集，形成肉眼可见的粉红色斑点，称为斑点免疫金染色(dot-IGS)。此反
固相载体上的斑点免疫金银染色法
实验概要本实验介绍了硝酸纤维素膜(NC膜)上的斑点免疫金银染色操作流程。实验原理蛋白质抗原通过直接点样或转移电泳吸附在硝酸纤维素膜(NC膜)上，与特异性抗体反应后，在滴加(或浸入)胶体金标记的第二抗体，结果在抗原抗体发生金颗粒聚集，形成肉眼可见的粉红色斑点，称为斑点免疫金染色(dot-IGS)。此反
LB膜多功能拉膜机（膜天平）
产品详细介绍 JML04 LB膜多功能拉膜机（又称膜天平 FILM BALNCE）是测定极性有机物（两亲分子）物理化学特性的精密测量仪器。它可以动态地研究各种有机极性物质（蛋白质、脂质、高聚物等）的单分子层表面膜，记录膜的分子表面积（A）与表面张力（r）或表面压力（π）之间的函数关系，著名的生
DIG试剂盒杂交实验
实验概要Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位，可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割，通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段，随后，使DNA在原位变性，并从凝胶转移
酶标抗体和酶抗酶复合物的应用于斑点ELISA（dotELISA）
操作简便，不需要特殊仪器（酶联检测仪）。【试剂及配制】(1) 稀释液：为1%A的0.01mol/L pH7.4的。(2) 封闭液：为2% A的0.01mol/L pH7.4的。(3) 洗涤液：为0.5% Tween 20的0.01mol/L pH7.4的。(4) 底物溶液：见附录。【操作方法】(1)
分子杂交——Southern基因检测2
C．转移按凝胶的大小剪裁NC膜或尼龙膜并剪去一角作为标记，水浸湿后，浸入转移液中5min。剪一张比膜稍宽的长条Whatman 3mm滤纸作为盐桥，再按凝胶的尺寸剪3-5张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。（ 转移过程一般需要8-24hr，每隔数hr换掉已经湿掉的纸巾。转移液用20×S
Southern杂交实验2
③转移按凝胶的大小剪裁NC膜或尼龙膜并剪去一角作为标记，水浸湿后，浸入转移液中5min。剪一张比膜稍宽的长条Whatman 3mm滤纸作为盐桥，再按凝胶的尺寸剪3-5张滤纸和大量的纸巾备用。按下图所示进行转移。（转移过程一般需要8-24hr，每隔数hr换掉已经湿掉的纸巾。转移液用20×SSC。注
药物诱导细胞凋亡时Bcl2蛋白含量的变化
【原理】Western印迹法，把聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的组分从凝胶转移至一种固定支持体，以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。对于蛋白质来说，通常使用的探针是抗体，它与附着于支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。【试剂与器材】1.细胞裂解液：50mmol/LTris-HCl,150
转膜时甲醇的作用
转膜 将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体（例如 NC 膜）上，通常有两种方法：毛细管印迹法和电泳印迹法毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同，只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易，转移效率高；而后者适用于大胶的蛋白转移，所
Southern－Blot实验原理及方法
实验原理：Southern Blot是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，
分子印迹技术的概况
Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链，然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面放上吸水纸巾，利用毛细管作用原理使凝胶中的DNA片段转移到 NC膜上，使之成为固相化分子。载有DN
Southern－Blot杂交的原理、步骤及应用
原理Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是：具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原 则形成双链，此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方 法的灵敏性，综合凝胶电泳和 核酸内切限制酶分析的结果，便可绘制出DNA分子的限制图
放射性标记探针与核酸杂交反应的步一般过程
1、配制所需试剂SSC 溶液(20×):3mol/L NaCl,0.3mol/L 柠檬酸钠。Denhardt’s溶液(50×):聚蔗糖5g,聚乙烯吡咯烷酮5g,牛血清白蛋白(BSA)5g,加水至500mL。预杂交液:6×SSC,5×Denhardt’s溶液,0.5%SDS,100μg/mL 经变性或
什么是分子印迹技术
第八章 分子印迹技术将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术（blotting）。Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链，然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面
分子印迹技术和基本介绍
将各种生物大分子从凝胶转移到一种固定基质上的过程称为印迹技术（blotting）。 Southern在1975年首先提出了分子印渍的概念。他将琼脂糖凝胶电泳分离的 DNA片段在凝胶中进行变性使其成为单链，然后将一张硝酸纤维素(nitrocellulose， NC)膜放在凝胶上，上面放上吸水纸巾
光敏生物素试剂盒杂交实验
实验概要 Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位，可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割，通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段，随后，使DNA在原位变性，并从凝
WesternBlot实验方法及注意事项
实验原理：WesternBlot印迹方法，又称为免疫印记，是将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离，并通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印至固相支持物（NC膜或PVDF膜）上，用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与转印后膜上的靶蛋白进行特异性结合，再与经辣根过氧化
制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧（一）
硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论. 一. NC膜的生产原理这个虽然看上去
LB膜拉膜机功能
主要功能和特点1、操作过程和数据采集由PC计算机和前置单片机控制，实现自动化和智能化，使人为操作误差的可能降到最低；2、关键零部件（包括传感器）进口，测试数据精确，重复性好；3、基于WINDOW视窗的全中文操作软件，用户界面友好，图形可存储打印，数据可二次处理；4、液槽表面积大，灵敏度高，泄漏小；5
何为吸热膜和反射膜？
市场上常见的汽车隔热膜从原理上讲分为吸热膜和反射膜。吸热膜是利用涂敷在透明聚酯膜表面的吸热胶吸收红外线，达到隔热的目的，而反射膜是在透明的聚酯膜上溅镀一层金属或纳米级陶瓷材料来反射红外线达到隔热目的。
何谓吸热膜和反射膜？
市场上常见的汽车隔热膜从原理上讲分为吸热膜和反射膜。吸热膜是利用涂敷在透明聚酯膜表面的吸热胶吸收红外线，达到隔热的目的，而反射膜是在透明的聚酯膜上溅镀一层金属或纳米级陶瓷材料来反射红外线达到隔热目的。
关于Southern杂交的洗膜的介绍
取出NC膜，在2×SSC溶液中漂洗5min，然后按照下列条件洗膜： 2×SSC/0.1% SDS，42℃，10min； 1×SSC/0.1% SDS，42℃，10min； 0.5×SSC/0.1% SDS，42℃，10min； 0.2×SSC/0.1% SDS，56℃，10min； 0
Western－blot使用哪种膜好？
可以考虑，转移缓冲液中加入20%甲醇，因为甲醇可以降低蛋白质洗脱效率，但可增加蛋白质和NC膜的结合能力，甲醇可以防止凝胶变形，甲醇对高分子量蛋白质可延长转移时间；转移缓冲液中加入终浓度0.1% SDS，也是为了增加转移效率；用优质的转移膜，或使用小孔径的NC膜，低浓度胶，提高转移电压/电流，增加转移
斑点酶免疫吸附试验的优点是什么？
加少量抗原于硝酸纤维素（NC）膜上，干燥后进行封闭；然后滴加样品血清；洗涤后再滴加酶标二抗，最后滴加能形成不溶有色物的底物溶液（如HRP标志物，常用二氨基联苯胺）；阳性者即可在膜上出现肉眼可见的染色斑点。 优点：灵敏度较普通ELISA高，试剂用量少，操作简单，NC膜可长期保存不影响活性。