苯酚法制备酵母tRNA

试剂、试剂盒 DEAE 纤维素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液 0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液 12mol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 lmol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 乙醚 水饱和酚 乙醇仪器、耗材 皂土电动搅拌器 离心机 部分收集器 紫外分光光度计实验步骤 一 材料与设备1)DEAE 纤维素:称取 20 g 交换量 l.Ommol/gDEAE 纤维素,先用 300 ml0.5mol/L 氢氧化钠浸泡 1〜2 h 搅拌, 倾去上清液后水洗至中性。2) 二乙醇胺 (TEA) 溶液:先用浓 HC1 调至 pH7.4, 然后稀释成 lmol/L 作为储液。3)0.lmol/LTEA 缓冲液 (pH7.4)4)0.lmol/L 氯化钠含 0.lmoi./LTEA 缓冲液,pH7.4,5)12mol/L 氯化钠含 0.lmol/LT......阅读全文

苯酚法制备酵母tRNA

试剂、试剂盒 DEAE 纤维素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液 0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液 12mol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 lmol L 氯化钠含 0.lmol LTEA 缓冲液 乙醚 水饱和酚 乙醇仪器

苯酚法制备酵母tRNA

            试剂、试剂盒 DEAE 纤维素   二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液  0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液

苯酚法制备酵母tRNA

通过 DEAE 纤维素柱纯化,除去少量 DNA、大分子 RNA、蛋白质、多糖等杂质,最后得到各种氨基酸专一性 tRNA 的混合物.试剂、试剂盒DEAE 纤维素二乙醇胺 (TEA) 溶液0.lmol LTEA 缓冲液0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液12mol L 氯化钠含

快速制备酵母DNA法

实验概要本实验制备了酵母转化质粒,快速从转化酵母菌中分离了用于Southern分析的基因组DNA。主要试剂2% Triton X-100,1%SDS,100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris-HCl(pH8),1mmol/L Na2EDTA,苯酚:氯仿:已戊醇(25:24:1),YP

苯酚法提取酵母RNA实验原理和操作步骤

(一)原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此,提取RNA时要把RNA与蛋白质分离并除去。将细胞置于含有十二烷基磺酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS)的缓冲液中,加等体积水饱和酚,通过剧裂振荡,然后离心形成上层水相和下层酚相。核酸溶于

酵母菌RNA制备实验—poly(A)+法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤一、热酸酚方案(基本方案1)1.  TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。2.  操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。3.  将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案(备择方案1)1.  将体积增加到15 ml

酵母蔗糖酶的制备实验——研磨法

蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranoside fructohydrolase ) ( EC. 3 . 2 . 1 . 26 ) 特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖, 也能催化棉

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定2

试剂和器材试剂1.DNA标准溶液(须经定磷确定其纯度):取小牛胸腺DNA钠盐以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成200 µg/mL的溶液。2.样品待测液:准确称取DNA干燥制品以0.01mol/L氢氯化钠溶液配成100 µg/mL左右的溶液。在测定RNA制品中的DNA含量时,要求RNA制品的每mL待

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定1

原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液中沉淀RNA,大部分蛋白质仍处于溶解状态。(3)以去污剂如十二烷基硫

苯酚硫酸法测多糖,苯酚硫酸怎么配制

苯酚硫酸法测多糖。 是将多糖在浓硫酸水合产生的高温下迅速水解,产生单糖。单糖中再加入苯酚反应(在强酸条件下)生成橙色衍生物。在波长490nm左右处和一定浓度范围内,该衍生物的吸收值与单糖浓度呈线性关系,从而可用比色法测定其含量。若要一起加入,先配成溶液的话。要先将苯酚溶于(温)水,然后将浓硫酸绶绶倒

酵母感受态细胞制备实验——试剂盒制备法

实验方法原理酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备酿酒酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。实验材料酵母菌试剂、试剂盒YPD培养基酵母化学感受态细胞制备试剂盒仪器、耗材离心管冰箱冷冻管保温冰盒实验步骤一、挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以),接

酵母基因组DNA的玻珠制备法

实验概要本实验利用玻珠制备法制备了酵母基因组DNA。主要试剂无菌水,裂解缓冲液,5mol/L NaCl,苯酚,氯仿:已戊醇(24:1),乙醇,TE缓冲液,EDTA-Sark,蛋白酶K,5mol/L醋酸铵主要设备摇床,玻璃离心管,台式离心机,玻珠,振荡器,P-1000移液器,1.5ml离心管实验步骤1

酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法

实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1.  培养并收集酵母菌细胞,冷冻细胞沉淀。2.  用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3.  加1体积冷的酸洗玻璃珠(体积与约200 μl 水相等)、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25:24 :1酚/

酵母DNA微量制备

实验概要本实验介绍了分别从40ml和5ml酵母培养液中制备酵母DNA的操作流程。实验步骤1. 酵母DNA微量制备(40ml)   1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培养液在30℃条件下培养细胞达最大生长量(过夜)。   2) 将上述培养物移入螺盖离心管,用医用离心机或Sorvall SS-

关于苯酚的制备方法的介绍

  苯酚最早是从煤焦油回收,目前绝大部分是采用合成方法。到20世纪60年代中期,开始采用异丙苯法生产苯酚、丙酮的技术路线,已发展占世界苯酚产量的一半,目前采用该工艺生产的苯酚已占世界苯酚产量的90%以上。其他生产工艺有甲苯氯化法、氯苯法、磺化法。我国的生产方法有异丙苯法和磺化法两种。由于磺化法消耗大

酵母蛋白质和-RNA-的制备(稀碱法)

实验概要本实验介绍了从酵母中分离制备蛋白质和 RNA 的原理和方法。实验原理酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液(0.2% 的氢氧化钠)处理酵母使细胞裂解,离心收集上清液,得到酵母核蛋白抽提液。用盐酸调节抽提液 pH 至 3.0 (核蛋白的等电点),核蛋白溶解度下降大量沉出,离心收集沉淀物为酵母蛋白质

酵母菌DNA制备

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材 玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤 1.  注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落,在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。2.  将1.5 ml 的过夜培养

酵母总RNA的制备

            试剂、试剂盒 AE 缓冲液。   苯酚 10%SDS  酚  氯仿   无水乙醇 乙醇.  3mol L 乙酸钠  无 RNase

酵母DNA的小量制备

            实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。

酵母总RNA的制备

试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase 的水仪器、耗材 髙速离心机实验步骤 一 材料与设备1)AE 缓冲液:50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3),lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡)。3)

酵母DNA的小量制备

实验方法原理 通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料 酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒 异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液T

酵母DNA的小量制备

实验方法原理通过消化细胞壁,然后用 SDS 裂解随之产生的原生质体就可以制备酵母 DNA。用这种方法可重复性地制备若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性内切核酸酶切割,也可用作 PCR 的模板。实验材料酶解酶 100T酵母细胞试剂、试剂盒异丙醇醋酸钾SDS醋酸钠山梨糖醇缓冲液TE酵母

苯酚法鉴别粮食新鲜好坏

  1 原理 新鲜粮食酶的活性很强,随着储存时间增长,酶的活性逐渐降低,可用酶的活性来判断粮食新鲜程度。该法利用邻甲氧基苯酚在过氧化氢存在的条件下,与新鲜的氧化还原酶作用,生成红色的四联邻甲基苯酚,陈粮则不显色。  2 试剂 1% 邻甲氧基苯酚溶液:取邻甲氧基苯酚用蒸馏100 倍稀释。3% 过氧化氢

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应,在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法...1

动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法原理细胞内大部分RNA 均与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。因此分离RNA时必须使RNA 与蛋白质解离,并除去蛋白质。除去蛋白质的方法主要有:(1)用氯仿-辛醇混合液剧烈振荡,使蛋白质变性。(2)在冷的2mol/L盐酸胍溶液

酵母菌RNA制备实验

实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材 离心管离心机摇床实验步骤 1.  酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期(OD600=1.0)。 2.  将培养液转移到50 ml,离心管,于4℃,1 500 g 离心3 min。 3.  弃上清,菌体沉淀用1 ml 冰冷的水

2.5.1-酵母总RNA的制备

试剂、试剂盒AE 缓冲液。 苯酚10%SDS酚氯仿 无水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸钠无 RNase 的水仪器、耗材髙速离心机实验步骤一 材料与设备1)AE 缓冲液:50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3),lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡)。3)10%SDS4)

酵母细胞核制备

实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1.  将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离心5 min。 2.  确定酵母细

酵母蔗糖酶的制备实验

研磨法             实验方法原理 蔗糖酶( inver tase ) (β-D-呋喃果糖苷果糖水解酶) ( fructofuranosidefructohydrol

酵母原生质体制备

实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD酵母消解缓冲液山梨醇抽提缓冲液贮存缓冲液液氮仪器、耗材 摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤   将酵母菌接种于YPD培养基(100 ml 到20 L),剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期(OD600≈1~5)。培养物在预称重的离心瓶中于4℃, 1 500 g 离